植物组织培养成功的关键(预防污染是植物组织培养成功的关键)

[摘要]论文网络和对的毕业生对实验室植物组织培养中的污染防治问题进行了分析和阐述，重点阐述了植物组织培养过程中应注意的操作问题，并对对的相关灭菌方法进行了说明。【关键词】消毒；组织培养；植物防污染组织培养是高中生物学的重要课程之一，也是植物生理学的一项新技术。该技术广泛应用于生产和科研，形成了自动化、规模化、可控化的培养模式。虽然植物栽培的相关理论和技术比较完备，但在污染防治方面还需要更深入的研究。1.无菌操作和组织培养在植物组织培养中，无菌培养和无菌操作是植物组织培养成功的关键。一方面，要避免自然生物侵入实验室，如微生物污染环境、衣服和皮肤。另一方面，我们应该避免用微生物感染实验者。为了防止真菌和细菌孢子的入侵，有必要清洁实验室。实验前，应仔细选择外植体并用对外植体消毒。其次，在组织培养实验中，防止外植体污染尤为重要，尤其是在高温和雨季。由于这些季节空气湿度高，微生物容易繁殖，在对不可能通过采取一般的解毒措施来有效地控制各种微生物。因此，对外植体应适当选择，如健壮植株和成熟种子，并严格消毒。1.外植体的选择在选择外植体时，实验者必须遵循“易启动、少污染”的原则。对文化的成功在植物的每一个部分都起着一致的作用，如茎段、茎尖的表皮和组织、花药、球茎、叶片和块茎的花瓣等。选择的外植体应是含有分生组织细胞的部分，且不易污染。同时，对外植体的应用需要在无菌条件下进行预培养，预先清洗枝条，然后插入自来水或营养液中形成外植体，可有效避免额外污染。成熟种子也可以灭菌制成无菌苗，芽的子叶、胚根和下胚轴可用作控制对污染的材料。此外，外植体的收集应在白天进行。与清晨相比，采集的外植体污染较少，因为阳光照射外植体后，细菌数量会大大减少。因此，在植物组织培养实验中，实验者需要选择表达能力强、不易污染的外植体，以提高培养成功的几率。2.外植体的灭菌外植体的灭菌包括两种方法：深度灭菌和表面灭菌。叶、茎段和茎尖的材料一般用表面消毒法消毒，可用自来水冲洗，用软刷去除表面的污渍，然后用氯酸钠和氯化汞等消毒剂浸泡。对于一些荚果植物，用氯化汞溶液消毒很困难。不同类型的外植体在灭菌方法上各有不同。例如，对应用于草莓茎尖组织，相关的灭菌方法涉及五种不同的操作类型，如次氯酸钠灭菌、次氯酸钙灭菌、过氧化氢灭菌、新洁尔灭灭菌等。其中，前四种灭菌方法更适合高中实验，但这四种灭菌方法需要较长的灭菌时间。然而，对的实验人员和对的接种材料都有很强的安全保障。当种子在对，消毒时，可以选择传统的消毒方法。传统的消毒方法是将对外植体浸泡在次氯酸钠溶液中长达30分钟，如有必要，在氯化汞溶液中消毒5分钟。

对于表面不光滑的材料，对可以在灭菌溶液中溶解少量表面活性剂，增加外植体与灭菌溶液的接触面积，提高对的消毒效果。3.不同消毒剂之间的对值高于酒精：浓度为70% ~ 75%，操作简单，杀菌时间为0.1 ~ 3分钟，杀菌效果较好；氯化汞：浓度为0.1% ~ 1%，操作困难。杀菌时间为2 ~ 10分钟，杀菌效果最好；漂白粉：使用饱和溶液操作简单，杀菌时间为5 ~ 30分钟，杀菌效果非常好；次氯酸钙：浓度为9% ~ 10%，操作简单，杀菌时间为5 ~ 30分钟，杀菌效果非常好；次氯酸钠：浓度为1% ~ 5%，操作简单，杀菌时间为5 ~ 30分钟，杀菌效果非常好；过氧化氢：浓度为10% ~ 12%，操作最简单，杀菌时间为3 ~ 5分钟，杀菌效果较好。第三，组织培养各环节的操作组织培养中不规范的手工操作是造成污染的主要原因，有必要通过手工手段科学有效地控制对可能出现的各种污染。污染因素主要来自培养工具和培养基，如各种器皿、剪刀和镊子。洁净工作台上的各种过滤装置在投入使用前没有经过充分消毒；实验者本人没有严格按照相关规定操作。对的污染控制主要需要注意以下问题。1.培养容器和培养基的消毒对种子材料、操作工具和培养容器用各种方法消毒。主要的灭菌方法可分为物理灭菌和化学灭菌。物理灭菌主要包括紫外线照射、烘箱干热和高压蒸汽。化学杀菌主要包括次氯酸钠、甲醛、漂白粉、新洁尔灭等杀菌方法。2.特殊活性物质和激素的灭菌当一些外植体不能通过高温灭菌处理时，可以使用生长调节剂如吲哚乙酸和赤霉素。用乙醚消毒的干物质对对进行了部分处理。乙醚的去除在低温环境下进行，并用无菌蒸馏水洗涤几次。最后，将外植体置于培养基中。结论防止污染是植物组织培养成功的关键。作为一名高中生，在组织培养实验过程中，应严格遵守实验规范，做好消毒工作，并做好手术前剪指甲、洗手等处理，以提高手术安全性。