大鼠海马定位示意图(微波辐照对大鼠海马COXI、IV基因表达影响)

摘要：目的研究微波辐照后大鼠海马组织细胞色素C氧化酶亚基一号，体外基因表达变化和对酶活性的影响，探讨微波辐照对大鼠海马能量代谢影响的机制。方法采用逆转录聚合酶链反应法检测微波辐照后海马组织柯西、血管内皮生长因子基因水平，采用还原细胞色素C法和高效液相色谱法(HPIC)分别检测微波辐照后海马组织细胞色素C氧化酶活性和三磷酸腺苷（三磷酸腺苷)，二磷酸腺苷(ADP)、一磷酸腺苷（安培(含量。结果微波辐照后，大鼠海马组织细胞色素C氧化酶活性和可承诺量含量明显降低，并与柯西、血管内皮生长因子基因表达变化呈一致性。结论微波辐照可影响大鼠海马柯西、体外基因表达而降低酶的活性，进而引起能量代谢障碍。

关键词：微波；海马；细胞色素C氧化酶；能量代谢

微波暴露对xivmrna表达的影响的效果

于建华，钟敏，谢衍，等等。

第三军医大学职业卫生系（中国重庆400038)

摘要：目的研究微波暴露后细胞色素氧化酶(考克斯)亚基、的表达和细胞色素氧化酶的活性，以及微波暴露对细胞色素氧化酶的影响。方法用聚合酶链反应检测微波照射后细胞色素亚单位和的表达。用高效液相色谱法和还原细胞色素法分别测定了环磷酸腺苷、腺苷二磷酸、腺苷一磷酸和环磷酸腺苷的含量。结果暴露后，细胞色素氧化酶亚单位和的含量均下降。结论微波辐射可提高氧的表达，Mrna和mRNAandavtivityofCOX，并进一步降低能量代谢率。

关键词：微波；海马体；细胞色素氧化酶；能量代谢

现代生活与微波技术的应用密切相关，由此导致的环境污染问题已引起了广泛关注。本研究选择在细胞色素C氧化酶（考克斯(活性中起主要作用的催化亚基号和调节亚基为观察指标，观察微波对考克斯活性和基因表达的影响，以期探讨微波辐照致大鼠海马能量代谢改变的分子机制。

1材料与方法

11材料(1)实验动物：健康雄性Wistar大鼠（第三军医大学动物室)，体重180 ~ 220克。(2)分组：随机分为对照组、微波辐照组。辐照组具体分为辐照后即刻，3，6，12h4个观察组，对照组及辐照各组均为12只大鼠，共60只(3)仪器：聚合酶链反应仪(美国乔丹公司)；凝胶成像系统(美国生物雷达公司)；Du640紫外分光光度计(德国贝克曼公司)；高效液相色谱仪(日本岛津公司)。(4)试剂* COXI引物（上游：5 ' GCTGCTATATAGGTAGAGA 3 '，下游：5 ' GCTTCGGAACTGACTTGTACC3 '，扩增片段约381个基点)；COXIV引物（上游：5 ' ggcagtggcagaatgttgg 3 '，下游：5'acaagcgcagtgaagccgatga 3 '，扩增片段约364个基点)；内参肌动蛋白（上游：5 ' TAAAGACCTCTAGCCACAGAGT3 '，下游：5 ' CACCATGGAGGGCCGGACTCATC 3 '，扩增片段约241bp)，所有引物由上海桑贡公司合成三磷酸腺苷二钠、腺苷二磷酸、胞苷(美国西格玛公司)。

12方法

将121只受辐射的动物放在一个能发射微波的特殊辐照箱中，在一个几乎没有反射的辐照暗室中接受全身辐照20分钟。辐照环境的温度和湿度用设备保持恒定，温度为(182)，湿度为50% ~ 70%。对照射组的治疗条件与照射组相同，只是不接受照射源的作用。

1 . 2 . 2 海马组织中腺嘌呤核苷酸的测定[1]将大鼠断头处死，在冰浴条件下分离海马，准确称量，按20l/mg组织加入预冷的02mol高氰酸匀浆，在4下以18000g离心15分钟。上清液用1摩尔/升碳酸钾中和，并将其酸碱度调节至65 ~ 70。离心重复一次。取上清液进行高效液相色谱分析，能量电荷由公式EC(能量电荷，EC)=(三磷酸腺苷05二磷酸腺苷)/(三磷酸腺苷二磷酸腺苷安培)计算。

123 海马组织的环氧化酶活性测定[2]在冰浴条件下分离海马，准确称量海马，的一边，并加入10毫升/升100毫克/毫升的预冷磷酸钠缓冲溶液以备后用。还原纯化后取015毫升/升细胞色素c 05毫升，加入24毫升10毫升/升磷酸钠缓冲液，摇匀，在37和550纳米波长下测量吸光度(A)值，然后加入01毫升组织匀浆，立即开始计时，然后每30秒测量一次，最后加入1滴饱和铁氰化钾测量A值，用最小二乘法通过原点计算其斜率K值，即细胞

大鼠腹腔注射2% 戊巴比妥(30毫克/千克)麻醉各组海马大鼠，从海马提取核糖核酸，用逆转录聚合酶链反应测定。柯西循环参数。95 30s，56 30s，721分钟，循环31次，725分钟；柯克斯循环参数：9530s，6130s，721分钟，循环40次，725分钟；-肌动蛋白循环参数：9530s，5630s，721分钟，循环31次，725分钟；聚合酶链反应产物进行15%琼脂糖凝胶电泳。

125图像分析：将经食管凝胶置于GelDoc2000凝胶图像分析系统中，通过扫描测量聚合酶链反应电泳条带的吸光度值，结果用每个检测基因与其自身-肌动蛋白条带的吸光度比值表示。

13统计分析采用SPSS100软件进行t检验。

2个结果

21对， 微波辐照能量代谢的影响(表1)海马的三磷酸腺苷含量比微波辐照后即刻的对组分别下降了85% (p