猴头菌提取物对肿瘤有效果吗(虎尾轮根提取物对脾虚小鼠的影响)
虎尾兰是豆科植物虎尾兰的全草,主要分布在云南,广东,广西,福建,台湾等省。根据《中药大辞典》、《闽南民间草药》和《台湾民间药》,护胃伦具有活血通络、健脾和胃、燥湿化痰的功效,用于治疗肺结核、咳嗽、肺痈、吐血、血尿、胃十二指肠溃疡、小儿疳积、白带、关节炎等疾病。在闽南,台湾和其他地区,虎胃伦被广泛用作治疗药物,在闽南,它经常被用作脾胃虚弱和营养不良儿童的药膳。
课题组前期对对虎尾轮的根和茎进行了初步研究[3-4],发现虎尾轮的根主要含有黄酮类、皂苷类、糖类、氨基酸类、酚类、有机酸类和甾体类;茎含有糖类、黄酮类及其糖苷。然而,对健胃健脾的有效成分仍不清楚。本研究采用80%乙醇提取对虎威车轮的根,得到不同部位的提取物。观察了不同提取物对对大黄脾虚模型和脾虚厌食模型小鼠的影响。1仪器和材料
1.1动物健康昆明小鼠,清洁级,雌雄各半,体质量(202)g,由漳州卫生职业学院功能实验室提供。1.2药品和试剂采自福建漳州市和溪镇, 南靖县,经鉴定为DC海百合的根。漳州卫生职业学院药学系培训中心巫庆珍高级实验员。归脾丸(批号:20140826,九芝堂有限公司);大黄药材(漳州聚善堂制药有限公司)。其他试剂是分析纯的。
1.3仪表电子天平AB135-S (1/100,000)(梅特勒;KQ-50B超声波清洗机(昆山市超声波仪器有限公司);R50-2B旋转蒸发器(上海申生科技有限公司);SHB-水循环多用真空泵(上海亚荣有限公司)。2种方法
2.1试验样品的制备取虎尾轮根的粗粉,用80%乙醇回流提取3次,减压回收提取物得到提取物,用水悬浮提取物,用石油醚、乙酸乙酯和水饱和正丁醇提取,减压回收提取物中的溶剂得到石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物和水提取物。灌胃前用0.5%羧甲基纤维素钠溶液调至适当浓度,灌胃给药10毫升/公斤。2.2 大黄脾虚模型的建立[2,5,6]
2.2.1将80只造模小鼠随机分为正常组、模型组、阳性对组、乙醇提取组、石油醚组、乙酸乙酯组、水饱和正丁醇组和水组,每组10只。分别记录每只动物的体重,并正常喂养动物。除正常组外,每组灌胃给予大黄汤0.5g/10g,共8天。正常组给予相同体积的蒸馏水。最后一次灌胃大黄汤后,记录各组小鼠的体重。2.2.2从给药的第9天起,正常对组和模型组被给予相同体积的蒸馏水;每个提取部位组和醇提组给予1.2g生药/(kgd)。阳性组给予归脾丸0.064克/(千克天)。连续给药7天。
2.2.3肠推进率的测定在最后一次给予药学论文之前,再次记录各组小鼠的体重。记录后,各组小鼠禁食并保持水24小时。在实验过程中,空白组被给予墨果汁,而其他组被用墨果汁稀释。0.3毫升/10克体重后,颈部脱臼,30分钟后死亡。肠道被切开并迅速取出。用直尺测量从幽门到墨汁前端的距离作为在肠道中的前进距离,从幽门到回盲部的总长度作为小肠的总长度。计算了前进速度。推进率(%)=墨汁在小肠中的推进距离(厘米)/小肠总长度(厘米)100%。2.2.4胸腺系数和脾脏系数的测定取出处死小鼠的胸腺和脾脏,称量体重,计算器官系数。
2.3进食障碍脾虚模型的建立[7]2.3.1模型建立将80只小鼠随机分为正常对组、模型组、阳性对组(归脾丸组)、醇提组(总膏组)、石油醚组、乙酸乙酯组、水饱和正丁醇组和水提组,每组10只。分别记录每只动物的体重,并正常喂养动物。除正常组外,每组每天灌胃给予精制猪油(0.2毫升/10克),同时喂白菜8天。正常组给予相同体积的蒸馏水。
2.3.2从给药的第9天起,正常对组和模型组被给予相同体积的蒸馏水;每个提取物组和总糊剂组给予1.2g生药/(kgd)。阳性对组给予归脾丸0.064克/(千克天)。连续给药7天。2.3.3一般观察和体重测量观察并记录小鼠的活动、饮食、体形变化、腹泻、厌食和皮毛颜色。每天灌胃前测量体重。
2.4统计方法数据用SPSS 17.0统计软件进行分析,测量数据用(x [tx-* 3] s)表示,并进行t检验,P0.05表明差异有统计学意义。3个结果
3.1对大黄小鼠脾虚模型的作用3 . 1 . 1对小鼠肠推进率的影响大黄汤灌胃造模后,与正常对组相比,小鼠大肠推进距离变长,推进率增加;给药组脾虚小鼠的肠推进距离有不同程度的缩短,乙醇提取物组、乙酸乙酯组和正丁醇组的肠推进距离明显缩短(P0.05)。结果表明,造模后小鼠推进率增加,乙醇提取物组、乙酸乙酯组和正丁醇组小鼠推进率明显下降,如表1所示。
3.1.2胸腺系数和脾脏系数对对小鼠的影响经过一周的自我恢复,指数和脾脏指数的胸腺略有恢复,但明显低于正常对组(P 0.05);与模型组相比,各治疗组大鼠胸腺指数和脾脏指数指数均有所增加,而乙醇提取物组、乙酸乙酯组和正丁醇组增加更为明显(P0.05)。结果表明,造模后小鼠胸腺指数和脾脏指数减少;乙醇提取物组、乙酸乙酯组和正丁醇组能显著增加指数和脾脏指数的胸腺。见表2。3.2对脾虚食滞证模型的影响饲喂精炼猪油和白菜后,第3天开始出现腹泻,为黄色软便;持续喂养后,第5天开始出现反应慢、动作慢、体瘦、皮毛稀疏分散等症状。按照“2.3.2”的方法,给药3天后,各给药组小鼠的饮食逐渐增加,体重略有增加,大便趋于正常,给药后形成大便。然而,模型组中的小鼠
目前,建立脾虚模型的方法有很多种。本文采用大黄苦寒泻法和进食障碍法复制脾虚模型。大黄苦寒下法简单易行。动物大便稀稀、消瘦、苔枯等症状与脾虚的临床症状相同,表明本实验建立的脾虚模型是成功的。胸腺和脾脏是人体重要的免疫器官。胸腺指数和脾脏指数可以反映它们的发育和功能,并间接反映机体的免疫水平[8]。实验以肠墨汁、胸腺指数和脾脏指数的推进率为指标。结果表明,总乙醇提取物组、乙酸乙酯组和水饱和正丁醇组能显著降低小鼠的肠道推进率,提高胸腺指数和脾脏指数小鼠饲喂精炼猪油和白菜,并复制脾虚模型。实验动物出现反应慢、动作慢、体瘦、皮毛稀疏、毛发散乱等症状,表明本实验建立的脾虚模型是成功的,给予乙酸乙酯和水饱和正丁醇后,小鼠体重明显增加,并形成大便,可改善脾虚症状。
实验结果表明,虎尾轮根提取物能增加小鼠体重,胸腺和脾脏指数,改善小鼠脾虚症状,并具有健脾和胃的作用,而乙酸乙酯和水饱和正丁醇效果较好。在本实验中,虎尾轮根提取物的得率为7.3%。萃取后,石油醚层各萃取物的产率为0.25%,乙酸乙酯层为0.4%,水饱和正丁醇层为0.8%,水层为3.5%。胡维伦的根含有黄酮类和皂苷类,它们具有很高的极性。有效物质主要存在于正丁醇层和乙酸乙酯层,为虎尾轮药用价值的研究奠定了实验基础。
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