03年何仕华千年古茶树茶(千年古茶树组培技术研究)

贵州，普定县和化处镇是朵贝贡茶的故乡。一棵古老的茶树生长在张家村的贡山，已经有几千年的历史了。据专家研究，它被认为是中国小叶茶树品种中最古老、最大、保护最好的古茶树，被称为“功茶之祖”，是贵州的第一棵古茶树。这棵树占地50多平方米，是一棵灌木型野生茶树，根粗、干壮、叶厚、嚼起来有甜味、富有流涎。经过几千年的风吹霜打，它仍然郁郁葱葱。为了保护这一珍贵的自然资源，采用植物组织培养的方法[1-2]，在对进行了古茶树的快速繁殖试验。

1材料和方法1.1待测试的材料

试验材料是古老茶树的枝条，芽饱满。用自来水冲洗外植体，将其切成2 ~ 3厘米长的茎，用洗衣粉水冲洗，然后用75%酒精处理30秒，用0.1%氯化汞溶液浸泡5分钟，用无菌水冲洗备用。1.2测试方法

1.2.1诱导培养。以MS为基础培养基，添加琼脂0.7%，蔗糖30 g/L，pH值5.8，6-BA 4种浓度和NAA及IBA相同浓度形成8个组合，每个组合接种20个外植体进行培养[3-5]。1.2.2传代培养。在增殖培养基中加入不同浓度的6-BA和IBA，形成9种激素浓度组合，将诱导芽接种在增殖培养基上培养，55天后计算增殖倍数[6-8]。

1.2.3生根培养。1/2 MS培养基，琼脂0.7%，蔗糖20 g/L，pH 5.8，加入吲哚乙酸、NAA和吲哚乙酸形成9种激素浓度组合，接种幼苗，观察幼苗生长30天，60天后计数结果[9-10]。2结果和分析

2.1发现芽在15天后萌发，30天后膨大，45天后出现不定芽，55天后长到2 ~ 3厘米。芽诱导的培养基是1.5毫克/升的6-氨基丁酸和0.1毫克/升的吲哚丁酸(表1)。

2.2继代培养试验结果表明，培养35天后，可分化出3 ~ 5个不定芽，55天后芽长到3厘米时，可继续继代培养。继代培养中，MS 6-BA 1.5毫克/升、IBA 0.2毫克/升效果最好，增殖倍数为4.5倍(表2)。

2.3生根培养结果表明，培养60天后，有3 ~ 5个乳白色的根能够生长。最佳生根培养基为1/2毫秒吲哚乙酸0.3毫克/升(表3)。

结论与讨论千年古茶树是罕见的古树。本研究以腋芽为外植体进行诱导培养，筛选出适合芽诱导、芽增殖和生根的培养基。生根率达到90%，繁殖倍数达到4 ~ 5倍。目前，古茶树组织培养技术取得了突破性进展，但其生长缓慢，需要进一步解决。