菌株购买(高效利用秸秆的香菇新菌株选育?)
香菇是一种食药用菌,具有浓郁的香气,肉质细嫩可口,营养价值高,药用价值好,经济价值好。由于香菇属于木腐菌,用替代材料栽培时,对阔叶林中锯末的消耗量很高,高栽培成本已成为制约香菇产业发展的重要因素。在生产中,香菇培养基的配方数十年来一直采用782011的常规配方,新配方的研究很少报道。由于香菇属于白腐菌,能产生木质素降解酶,因此可以用稻草栽培香菇2号和3号。
1材料和方法1.1试验材料
1.1.1香菇8号和香菇L26菌株由绥化大学食用菌研究所提供。1.1.2用于分离孢子:酵母提取物的培养基3 g、蛋白胨2 g、KH2PO4 0.46 g、K2HPO4 1 g、硫酸镁0.5 g、葡萄糖20 g、http://1 0001.com/20g、蒸馏水1000毫升,自然酸碱度.
综合平板培养基:马铃薯200克(去皮),蛋白胨5克,麸皮50克,KH2PO4 3克,硫酸镁1.5克,葡萄糖20克,VB1 20毫克,http://1 0001.com/20克,蒸馏水1000毫升,自然酸碱度.秸秆筛分介质:锯末20%,玉米秸秆粉68%,麦麸10%,蔗糖1%,硫酸钙1%,自然酸碱度。玉米秸秆粉的制备:玉米秸秆经风干、除杂、切段(每段约3厘米长)、干燥、粉碎等预处理。然后用40目筛过筛。
1.1.3测试仪器bl-50A立式压力蒸汽灭菌器(上海东亚压力容器制造有限公司);SW-CJ-2F洁净工作台(苏州净化设备有限公司);HPX-9162 MBE 型恒温培养箱(上海博迅工业有限公司医疗设备厂);LRH-400-GSI人工气候箱(韶关市泰宏医疗设备有限公司)。1.2测试方法
1 . 2 . 1 核菌丝的获得和出发菌株(种蘑菇)的处理4:适当地切掉种蘑菇的部分菌柄,用75%的酒精对剩余的子实体进行消毒,并将其放入经过消毒的孢子收集装置中以收集孢子的孢子分离物5:用无菌水将收集的孢子反复稀释至106片/毫升的浓度,吸取适量的孢子溶液并将其注入孢子分离介质中, 将它均匀地铺开,然后放入25的恒温箱中,大约8 ~ 9天后孢子丝发芽。
孢子丝的诱变:发芽后,将孢子丝转移到30瓦紫外线灯下30厘米处进行诱变。照射时间分为5个处理:0.5、2、4、6和8分钟,每个处理重复3次。诱变后立即用黑布包裹,置于25恒温温培养箱中连续培养。单个核菌丝6号的鉴定:暗培养约4天后,选择边缘菌丝,用显微镜观察鉴定。如果没有锁定的联想,可以认为是核菌丝,然后转移到斜面培养基培养。培养12 ~ 14天后,剔除生长不理想的菌丝体,保留生长良好的单个核菌丝菌株作为杂交试验的亲本菌株。
1.2.2与对杂交将筛选出菌丝特性较好的菌株,并将其与对成对接种在一个培养皿中,培养皿中有一个平坦的综合培养基,距离为1.0~1.5厘米。培养10 ~ 15天后,将菌丝体接触,并挑选接触的菌丝体进行显微镜检查。锁接现象可视为双核菌丝,表明杂交成功,然后转移到斜面培养基上,在25恒温培养。1.2.3拮抗试验:将有效的杂交菌丝体接种在平的综合培养基中间,将两个亲本菌丝体接种在两侧,距离为2 ~ 3厘米,培养一个月后观察拮抗现象。由于同一物种的菌丝可以融合生长,在交叉点没有拮抗线,只有当杂交后代和亲本菌丝之间同时出现两条黄棕色的拮抗线时,杂交后代才是真正的杂种7,8。